Tras pasar cuatro años en estado de coma, la muchacha se embarca en búsqueda de justicia contra los responsables: sus ex camaradas de una vida que ella ya dejó atrás. Estos camaradas, un grupo de élite de asesinos liderados por el personaje que da nombre al film, Bill -David Carradine- conforman el llamado The Deadly Viper Assassination Squad (Escuadrón Asesino de Víboras Mortales), o DiVAS.
Cada uno de estos dotados asesinos tiene un nombre codificado, de acuerdo con diferentes especies de serpientes venenosas: O´Ren Ishii -Lucy Liu- es Cottonmouth, Elle Driver -Daryl Hannah- es California Mountain Snake, Vernita Green -Vivica A. Fox- es Copperhead, y Budd -Michael Madsen- es Sidewinder.
Bill ha invertido una cantidad considerable de dinero y de tiempo en el escuadrón DiVAS, pero uno de sus engreídos integrantes significa para él más que un “despiadado bastardo asesino”: “La novia” misma, cuyo nombre en código es Black Mamba, puede que sea la asesina más talentosa de todos y ahora está buscando venganza.